五层细胞培养瓶
所属分类：
生物耗材
产品描述
• 高透明度医用级聚苯乙烯材料
• 培养面积：870cm²
• 无热原、无内毒素
• 辐照灭菌，无菌包装
• 培养表面 TC 处理，确保细胞生长良好
小提示:
在使用五层细胞培养瓶时，必须非常小心操心，避免操作过程中产生气泡。气泡能在挡板处形成一个虹吸桥， 导致上层培养基慢慢流到最下一层。
使用指南——细胞悬液接种到多层细胞培养瓶：
1. 细胞悬液混匀：按照实验要求的浓度准备细胞，在培养基瓶、培养瓶或其他容器中混匀。建议的工作容积为每层30-50 mL。
2. 用移液管紧贴瓶壁缓慢地将液体加到五层细胞培养瓶中，避免产生泡沫或者气泡（每次加液时移液管内液体可留少许）。
3. 注意事项：10 mL移液管可以伸到培养瓶底部使培养基分散开，而25 mL移液管则只能伸到NEST标志的地方把液体分散开。
4. 把培养瓶有NEST标志那一侧朝向自己，顺时针倾斜45度左右放置一段时间，使瓶中各个隔层的液体达到平衡。
5. 轻缓地将培养瓶水平放置于工作台上，有耐思标志那一面朝上。
6. 前后左右轻轻晃动多层瓶，液体会均匀地分布在五个生长面上。
7. 注意事项：摇晃的动作要轻柔，一方面是防止起泡沫，另一方面是要防止培养基渗漏到下层中。
培养液的移除
1.抽吸法：
①抽吸的时候，将多层瓶倾斜45度，有NEST标记的一面朝向自己。
② 将移液管伸到底部抽吸培养基，直至完全抽吸完。
2. 倾倒法：将有NEST标志的一面朝向自己，逆时针45度倾倒液体。
注意事项：抽吸培养液时建议使用10ml移液管，才能将培养液吸尽。
细胞的收集
1. 用缓冲液清洗一遍以去除残留的血清，后加入消化液（≥ 5 mL/层），混匀。
2. 消化大约2 min（视细胞情况而定），用消化终止液中和消化液。
3. 采用移液管抽吸法或倾倒法将细胞悬液置于离心管等容器中。
4. 用一定量的缓冲液冲洗多层瓶三次，将冲洗液分辨置于离心管中，混匀计数或者传代接种。